原种、栽培种生产工艺及技术要求
原种和栽培种生产工艺及技术要求都是相同的,只是培养基材料不同要求不同。谷粒种、木屑种、草料种和木塞种这五个种种型中,比较而言,木屑种和草料种灭菌需要时较短,木塞种需要时中等,而谷粒种和粪草种灭菌需要较短,木塞种需要时中等,而谷粒种和粪草种都需要时较长,且常压蒸汽灭菌很难达到彻底灭菌的效果。因此,必须采用高压蒸汽灭菌。原种和栽培种的生产工艺流程:配料→分装→灭菌→冷却→接种→培养及检查→成品→包装入库。
一配料浸泡
1谷粒种选择
洁净干燥的谷粒,可用小麦、大麦、燕麦、高粱、玉米、谷子等,筛选干净后,在清水中浸泡8-12小时。浸泡时间依季节温度而定,低温季节需要时间长些,高温季节时间短些。侵泡时间切勿过长,以防出芽。再在沸水中煮15分钟左右,以粒籽充分吸水又不胀破为度。然后将谷粒捞出,滤去多余水分后,散铺在可滤水的器具内,如筛子,苇席,略晾干,以表面不见水膜为度。最后拌入石膏、石灰等,并搅拌均匀。
2木屑种选择
洁净均匀的阔叶树木屑和辅料,木屑要过筛,去除尖锐的小木渣,这对袋装菌种特别重要。按配方称取后,混合均匀,然后加水搅拌,直至适宜的含水量,一般含水量在55%-65%,依季节不同和品种的不同含水量不完全相同。一般而言,高温、高湿季节,含水量要偏低些。
3草料种选择
新鲜洁净无霉变的原材料,按配方称取后,混合均匀,然后加水搅拌至适宜的含水量,搅拌时要注意不可有“夹生料”。
4粪草种
按配方称取原材料,边浇水、边搅拌,使其均匀,含水量达到70%-75%,然后建堆发酵,发酵期16-20天,发酵期内翻堆4次。发酵完成后,培养料柔软、疏松有弹性,有发酵香味,呈咖啡色。
5木塞种
将种粒用1%糖水或营养液(每100升水中含糖1千克,石膏1.5千克,过磷酸钙1千克,尿素0.5千克)浸包12小时(一夜),然后捞出待用。种粒可专门购买,也可自制,自制种粒有两种:用皮带冲冲出的规则种粒和用剪枝刀剪出的枝条种。用皮带冲自制的具体方法:先将种木锯成1.5厘米左右厚的木片,然后再用皮带冲冲出桶形木块。木屑填充物的配方常用的是:阔叶树木屑78千克,麦麸或米糠20千克,糖1千克,石膏1千克,加水至含水量55%-60%。将培养料和水搅拌均匀后备用。种粒与木屑填充物的比例(干重)是10:3,即每100千克干重的种粒,配以30千克干重的木屑填充物。先将种粒与2/3的木屑填充物混合,余下的1/3留作表明覆盖。
任何种型的培养基,在配置后都要测试PH,如果发现PH不适,要及时调整。多数食用菌的原种和栽培种的培养基灭菌之前应在PH6-7之间。多数地区的自然水拌料后都在这一范围。加有1%或超过1%石灰的配方,PH会超过7.5,灭菌后会有较大的下降。
二分装
分装是将配置好的培养基分别装到待定的原种或栽培种使用的容器中,如菌种瓶、菌种袋。不论是装瓶还是装袋,都要求装的松紧适度,培养基上端距瓶口(袋口)要有3厘米左右的距离,瓶(袋)口要干净。
三灭菌
分装完毕后,马上灭菌,不可隔夜,特别是在高温高湿季节,拌料和上锅最好在8小时内完成。这一时间间隔越短,灭菌效果越好。不论使用高压锅灭菌,还是自制常压锅灶灭菌,灭菌物品的排放都不可过于拥挤叠压,以免蒸汽穿过不均匀,灭菌不彻底。当使用较大的灭菌设备时,要使用铁筐或隔板,以利蒸汽均匀流通,使灭菌物品受热均匀。当低温季节使用玻璃瓶做容器时,切勿凉瓶进热锅,以防菌瓶炸裂。
1、高压蒸汽灭菌 使用压力容器,首先要认真阅读使用说明,并严格按说明操作
A谷粒一次灭200瓶一下时,0.14兆帕需要3-4小时,300-500瓶需要4-5小时。500-800瓶需要6-7小时;
B木屑和草料 0.12兆帕200瓶一下需要1.5小时,300-500瓶需要2.5小时。
C粪草 0.12兆帕200瓶需要4小时,300-500瓶需要5小时。
2、常压蒸汽灭菌 一般来说,常压蒸汽灭菌不适合需时较长的培养基,如谷粒和粪草。常压蒸汽灭菌常用来灭菌木屑种型和草料种型的培养基。一般达到100°C后开始计时,维持10-12小时,达到灭菌时间后停止加热,然后再焖一夜就可以以出锅冷却。
使用常压蒸汽灭菌锅要注意以下三点:水量要足,以产生足够的蒸汽;灶体不可过于严密,以利锅内冷空气的排出,蒸汽的流通,但也不可严重漏气,以利保温;火力要足,以使蒸汽充足,能较快穿透灭菌物品。火力不足时,虽然锅里的水处于100°C,但产生的蒸汽量不够,培养基升温很慢,按预定时间达不到预期的灭菌效果。
四冷却
冷却室是高度无菌的,因此,从高压锅或常压锅内取出的物品就直接置于了冷却室冷却即可,搬运时要轻拿轻放,避免刺破摔坏菌袋(菌瓶)。
五接种
冷却至30°C左右时应及时接种。因为在灭菌后与接种之前的时间越长,菌种袋(瓶)的表明被污染或沉落有灰尘的概率越大,造成接种操作污染的可能性就越大。
六培养与检查
培养室使用前要认真做好清洁和消毒工作,清洁时要注意不要扬尘,有条件的菌种场要定期清洁和消毒。培养期间主要做好两项工作:一是环境条件的调控;二是对菌种生长情况的检查,及时拣出劣杂个体
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