菌丝颉颃试验
同一食用菌经分离或杂交,将选育出许多不同的菌株,这些菌株的菌丝在形态上很难区别。在当前
菌种管理工作尚不十分健全的情况下,”同名异株“、”同种异名“的现象普遍发生,为区分菌株见的差异,可采用颉颃试验,颉颃试验又叫对峙培养。
菌丝真菌的形态建成分为以下三个方面,分别是菌丝顶端生长,分枝和菌丝融合或网结现象。因为隔膜孔的存在,整个菌落都是想通,所以细胞质可以在整个菌落中进行有序的流动。菌丝经过相互接触,识别、融合的过程之后,如果菌丝间是不亲和的,融合细胞与其他细胞间的隔膜孔封闭,使融合细胞形成一个密闭的细胞,接着这个细胞发生程序化死亡,有时还诱导相邻细胞发生程序化死亡。在这个过程中,由于细胞的死亡,菌丝相互接触的菌丝稀疏,同时有色素积累,使颉颃区的边缘有明显的颜色变化,这些特征往往作为鉴定菌种颉颃的特征。颉颃反应通常有以下三种形态特征:
(1)隆起型 颉颃反应的形态特征之一,表现为两菌种交界处菌丝隆起。
(2)沟型 颉颃反应的形态特征之一,表现为两菌种菌落近交界出气生菌丝密集或稍隆起,两隆起之间培养基明显可见,外观似沟。
(3)隔离型 颉颃反应的形态特征之一,表现为两菌种菌落之间有一定宽度的培养基明显可见,两菌落表现为明显的隔离。
颉颃试验可以采用平板进行,也可以采用斜面进行,采用平板进行颉颃试验的菌体方法,是将供试的菌株接种在平皿上相互接种后,产生明显的颉颃线,表明菌株为不同的菌株。采用斜面进行颉颃试验的具体方法,取1支20毫米×200毫米的无底试管,中央部位装入长5-7厘米的木屑麸皮培养基或其他适宜的培养料,两端压平并盖棉塞,灭菌后,两端各接入两株共试菌种1小块,在25℃条件下培养,当两端菌丝往中央生长并相互接触后,把斜面移至20℃,约300勒克斯的散射光下继续培养,观察菌丝接触区有无对峙反应。若无明显的颉颃线,表明两个供试菌株的基因极相似或相同,是相同的菌丝;如果供试菌株间形成明显的颉颃线,则表示是不同的菌株。
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食用菌栽培技术