母种制作过程中培养基灭菌后凝固不良，甚至不凝固。可以按照以下步骤分析原因：  1、先检查培养基组分中琼脂的用量与质量。  2、如果琼脂没有问题，在用PH试纸检查培养基的酸碱度，看培养基是否过酸，一般PH低于4.8是凝固不良；当需要较酸的培养基时，可以适当加大琼脂的用量。  3、灭菌时间过长，一般在0.15兆帕超过1小时后易凝固不良。  4、如果以上都正常，我们还要考虑称量公斤是否准确，有些小市场购买的称量公斤不是很准确。建议称量工具到正规厂家或专业商店购买